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瑞氏-吉姆萨染色法:细胞染色全攻略 瑞氏-吉姆萨染色(Wright-Giemsa Staining)的原理: 瑞氏染料由酸性染料伊红和碱性染料亚甲蓝组成。血红蛋白和嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合呈红色;细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性蛋白质,与碱性染料美蓝或天青结合,呈紫蓝色;中性颗粒呈等电状态,与伊红和美蓝均可结合,呈淡紫色。 吉姆萨染料由伊红和天青组成,染色原理与瑞氏染色法基本相同。瑞氏染色法对细胞浆内的颗粒染色效果好,但对细胞核的染色不如吉姆萨染色法。吉姆萨染色法对细胞核着色好,但对胞浆颗粒着色较差,且有时对细胞核着色较深,核结构显示不佳。为兼顾二者之长,常用瑞氏-吉姆萨复合染色法。 用途和目的: 常用于血液涂片、肺泡灌洗液涂片、骨髓细胞涂片、细菌、染色体、组织切片等的染色。标本染色后,相应各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态特征的目的。 染色步骤: 自来水流水缓慢冲洗晾干后的载玻片洗去杂质,注意流水从涂片上方流下,避免直接冲洗细胞; 将载玻片晾干后置于瑞氏染液中染色10分钟; 尽量沥干载玻片,再置于吉姆萨染液中染色4分钟。染色完毕后流水缓慢冲洗载玻片,将多余染液洗去; 载玻片晾干后显微镜下观察。 此法常用于小鼠肺泡灌洗液涂片的染色,其他标本可以根据染色结果适当调整染色时间。 显微镜下细胞的辨别: 红细胞:平均直径7,细胞呈粉红至红色,中央因双凹圆盘结构而呈现空白。 单核细胞:胞体圆至椭圆形,直径12-20,胞浆灰蓝色且稍有粗糙感,半透明似毛玻璃,胞质中常有小空泡。成熟的单核细胞胞核呈肾形、马蹄形、不规则形等,细胞核常有扭曲和折叠感。 淋巴细胞:分大(直径12-15)、小(直径6-9)两大类,圆形或椭圆形,胞质淡蓝色透明,无颗粒或偶有数颗紫红色的嗜天青颗粒。核圆形,直径接近细胞直径80%,染色质呈浓集的团块状。 中性粒细胞:胞体圆形至椭圆形,直径10-15。胞质呈无色或极浅的淡粉红色,弥散分布许多浅红或浅紫的细小颗粒。细胞核形态多样,可呈长杆状,也可为分叶状核,2-5叶不等,叶与叶间有细丝相连。 嗜酸性粒细胞:细胞直径13-15,胞浆中充满嗜酸性颗粒,颗粒粗大整齐,排列均匀紧密,为砖或鲜红色。在染色较深的涂片中,颗粒呈现深橙、棕至咖啡色。细胞核分叶,多为两叶呈眼镜状,颜色为深紫色,偶见3叶。
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