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Tween20在线播放_tween20是什么(2024年12月免费观看)

内容来源：兔子在线电影所属栏目：导读更新日期：2024-12-04

Tween20

TWEEN-20空间：光影科技结合 𐟏⠥“牌：TWEEN-20 𐟓 地点：中国广东广州 𐟎蠨𜚓ORA⮯𘏠 𐟔 在为TWEEN-20规划空间区域的功能性时，我们意识到这个空间需要容纳产品研发、展览、直播和办公等多种业态。结合建筑本身25米宽、110米进深的原始环境，以及其独特的弧形天花结构，我们决定尽可能保留这些原始结构，并以此为基础进行设计。这样，日光可以从各个方向充分照射到这个环形空间，创造出独特的光影效果。 𐟒ᠥœ訧†觉呈现上，我们以「航空登机站」为设计概念，灵感来源于机舱窗户的方形与圆形特点，将其转化为TWEEN-20字体与辅助图形的设计语言。这不仅呼应了空间的弧形天花结构，还增强了空间、概念和视觉三者之间的关联性。 𐟔⠦�䖯𜌦ˆ‘们还在视觉设计中运用了箭头符号和数字编号，为开阔的空间标示出明确的动线引导，进一步强调了空间的秩序感和科技感。

WB实验全攻略：从准备到结果解读 𐟓š𐟔젥ꌥ‡†备试剂清单：分离胶、浓缩胶 SDS loading buffer（还原型，5x）电泳缓冲液电转缓冲液封闭液 TBST/PBST洗膜液抗体预染的 Protein Marker ECL化学发光试剂仪器设备： -20Ⰳ低温冰箱 BIO-RAD垂直板电泳转移装置或NOVEX iBlot蛋白快速电泳/干转印系统多用脱色摇床耗材与杂品：各种规格的吸头、离心管和加样器烧杯、量筒和平皿等玻璃器材 PVDF膜（0.22/0.45，根据分子量大小而定）滤纸、手套、搪瓷盘（>20x20cm）滚轮、计时器、吸水纸等 𐟧갟“ 试剂配制 TBST： TBS(10x) 100mL + 纯水 900mL + Tween20 5mL PBST： PBS(10x) 100mL + 纯水 900mL + Tween20 5mL 𐟖寸𐟓Š 实验步骤样品处理：提取蛋白质，加入SDS loading buffer，进行电泳。电泳：在BIO-RAD垂直板电泳转移装置或NOVEX iBlot蛋白快速电泳/干转印系统上进行。转膜：将分离的蛋白质转移到PVDF膜上。封闭：用封闭液封闭膜上的非特异性结合位点。抗体孵育：加入一抗和二抗，进行孵育。显色：使用ECL化学发光试剂进行显色，获取图像。结果解读：根据显色结果，分析蛋白质的表达情况。

四种缓冲液配方，一文秒懂！ 𐟔 主要用途 𐟔 相同点与不同点 𐟔 应用小技巧 𐟌Ÿ 每1000ml配方： 𐟌🠔BS (Tris-Buffered Saline) 配方：6.05克 Tris base，85.0克氯化钠 (NaCl)，用HCl调整pH值至7.4-7.6 𐟌🠔BST (Tris-Buffered Saline with Tween-20) 配方：与TBS相同，加上1ml Tween-20 𐟌🠐BS (Phosphate-Buffered Saline) 配方：1.42克磷酸二氢钠 (NaH2PO4)，8.77克磷酸氢二钠 (Na2HPO4)，90.0克氯化钠 (NaCl)，用NaOH调整pH值至7.2-7.4 𐟌🠐BST (Phosphate-Buffered Saline with Tween-20) 配方：与PBS相同，加上1ml Tween-20 （增强型TBST缓冲液增加了新型抑菌剂和防腐剂）

实验室缓冲液大揭秘！嘿，大家好！今天咱们来聊聊那些在实验室里让人傻傻分不清的缓冲液：TBS、TBST、PBS、PBST。相信很多小伙伴都有过这样的困惑吧？别担心，看完这篇文章，你一定能搞清楚它们的区别！ TBS（Tris缓冲盐水） 𐟌€ 首先，咱们来说说TBS。TBS其实就是Tris-HCl缓冲盐溶液的简称。它主要由Tris和NaCl组成。Tris提供缓冲能力，能保持溶液在弱碱性环境下稳定；而NaCl则负责调节渗透压，让它接近生理条件。TBS在免疫测定、免疫组织化学染色、原位杂交、Western blot等实验中可是个大明星，广泛用作洗涤缓冲液或抗体稀释剂。配方也很简单：每1000ml需要6.05克Tris base和85.0克NaCl，用HCl调整pH值到7.4-7.6。 PBS（磷酸盐缓冲液） 𐟌🊦Ž夸‹来是PBS。PBS是一种以磷酸盐为主要成分的缓冲溶液，主要用于维持生物样品或实验体系中的pH稳定和渗透压平衡。它的主要成分包括KH2PO4、Na2HPO4、NaCl，有时候还会加点KCl。PBS的pH值相对稳定，常用于细胞实验、免疫染色等作为缓冲液或者洗涤液。配方也很直观：每1000ml需要1.42克NaH2PO4、8.77克Na2HPO4和90.0克NaCl，用NaOH调整pH值到7.2-7.4。 TBST（含Tween 20的Tris缓冲盐水） 𐟧𔊧„𖥐Ž是TBST。TBST是在TBS的基础上添加了Tween 20这一成分而得到的缓冲溶液。Tween 20是一种非离子型表面活性剂，能增强洗涤效果。它在Western blot实验中特别有用，能去除非特异性结合的抗体。配方和TBS差不多，只是多加了一毫升Tween 20。 PBST（含Tween 20的磷酸盐缓冲液） 𐟌𜊦œ€后是PBST。PBST是在PBS的基础上添加了Tween-20而得到的混合溶液。它在生物化学实验中的洗涤步骤中非常有用，能去除未结合的试剂，降低背景噪声，提高实验结果的信噪比。配方也很简单：每1000ml PBS加上一毫升Tween-20。总结 𐟓 总的来说，这些缓冲液在生物化学实验中都有各自的作用，但它们都含有维持溶液等渗的NaCl成分。希望这篇文章能帮你搞清楚它们的区别，下次再也不怕搞混啦！如果你还有什么疑问，欢迎在评论区留言哦！𐟘Š

TBST和PBST的区别及配制方法 𐟧ꥮž验室小白的笔记 TBST和PBST的区别 TBST是TBS加Tween-20的缩写，而PBST则是PBS加Tween-20。两者的区别主要在于pH值和用途。 1. pH值变化：TBST的pH值随温度变化较大，而PBST容易有沉淀。如果需要反复使用抗体，建议使用TBST，因为它更稳定。洗液效果：两种洗液在洗脱蛋白时效果相似，都能提供稳定的pH环境，并有助于蛋白的洗脱。PBST是基于磷酸盐缓冲液，而TBST是基于Tris缓冲液。 TBS缓冲液 TBS缓冲液是生物学中常用的等渗缓冲盐溶液，主要用于免疫组化、原位杂交和酶联免疫等实验中，清洗免疫印迹实验中非特异性结合的抗体等。它的配方（1X浓度）包括：1L的10X PBS缓冲液（1.37 M NaCl, 27 mM KCl, 100 mM Tris, pH 7.4），加入0.1%的Tween-20（1 mL/L PBS），再补足至1L以获得最终浓度。配置步骤如下：首先，用蒸馏水稀释10X PBS至1X，再加入Tween-20，混合均匀后过滤或离心去杂质。最后，分装到无菌瓶中，存放在4℃的阴凉处，避免反复冻融。 PBS缓冲液 PBS缓冲液是指磷酸缓冲液（Phosphate Buffer Solution），渗透压近似于生理条件又有很强的pH缓冲能力，常用来洗细胞（不易涨裂）和作为细胞培养的基础液（pH缓冲）。它的配方为10X PBS（1.37 M NaCl, 27 mM KCl, 100 mM Na2HPO4, 18 mM KH2PO4, pH 7.4），稀释至1X后加入0.1% Tween-20。与TBST相似，配制后过滤，分装并保存在适宜条件下。总结 TBST和PBST在实验室中都有广泛的应用，但它们在pH值和用途上有所不同。选择哪种洗液取决于你的具体实验需求。希望这些信息对你有所帮助！

BST不宜高压灭菌：防止吐温20起昙现象的有效方法 TBST（Tris-Buffered Saline with Tween 20）是一种常用的生物化学缓冲液，在Western blot等实验中用于洗涤膜上的非特异性结合物质。 TBST中含有Tween 20，这是一种非离子型表面活性剂，具有增溶和乳化的作用。然而，Tween 20在高压灭菌过程中可能会出现起昙现象，这是由于Tween 20中的疏水基团与水分子之间的氢键缔合在高温下被破坏，导致相分离。这种现象可能会影响TBST的性能和使用效果。为了防止Tween 20在TBST中起昙，可以采取以下有效方法： 1.过滤除菌：使用0.22微米的微孔滤膜对TBST进行过滤除菌。这种方法可以避免高温对Tween 20的影响，同时保证TBST的无菌状态。需要注意的是，Tween 20本身比较粘稠，高浓度时可能不好过滤。因此，在过滤前可以将TBST适当稀释，以降低Tween 20的浓度，提高过滤效率。 2.无菌操作：在配制和使用TBST时，严格遵守无菌操作规程，避免污染。使用无菌的容器和器具，确保整个操作过程的无菌性。 3.避免高温处理：尽可能避免对TBST进行高温处理，如高压灭菌等。如果确实需要对TBST进行灭菌处理，可以考虑使用其他非高温的灭菌方法，如紫外线灭菌或化学灭菌（但需注意化学灭菌剂对TBST成分的影响）。 4.质量控制：在配制TBST时，严格控制各成分的比例和浓度，确保TBST的质量和稳定性。定期对TBST进行质量检测，包括无菌检测、pH值检测等，以确保其符合使用要求。综上所述，为了防止Tween 20在TBST中起昙，建议采用过滤除菌的方法对TBST进行灭菌处理。同时，在配制和使用过程中严格遵守无菌操作规程，避免高温处理，并进行质量控制以确保TBST的质量和稳定性。这些方法可以有效防止Tween 20的起昙现象，保证TBST在生物化学实验中的正常使用效果。 #广州华韵生物科技有限公司#

Western Blot技巧：转膜封闭 𐟔 蛋白转膜：选择合适的膜材料在Western Blot实验中，选择合适的膜材料至关重要。聚偏二氟乙烯膜（PVDF）相较于硝酸纤维素膜，在蛋白质截留能力、机械强度和化学相容性上都有显著优势。PVDF膜的蛋白质结合量是硝酸纤维素膜的两倍，且结合强度更强，使其在各种染色应用和多重免疫检测中成为理想选择。特别是对于需要进行N端蛋白测序的实验，PVDF膜在严苛的清洗条件下仍能保持完好，是测序实验的首选膜材料。 𐟔젨𝬨†œ后蛋白的检测为了验证转膜是否成功，可以使用丽春红染色。丽春红染色剂带负电荷，能够与带正电荷的氨基酸残基结合，形成红色条带，从而检测转膜效果。这种染色方法是可逆的，染色后可以用蒸馏水、PBS或其他适当溶液洗去。 𐟛᯸ 膜的封闭杂交膜上存在许多非特异性蛋白质结合位点，这些位点可能与抗体结合，导致非特异性染色和背景。为了降低这种非特异性结合，通常使用惰性蛋白质或非离子去污剂封闭膜上的未结合位点。常见的封闭剂包括BSA、脱脂奶粉、酪蛋白、明胶和Tween-20（0.05-0.1%）等。 𐟧ꠔween-20：非离子型去污剂 Tween-20是一种非离子型去污剂，具有复性抗原的作用，可提高特异性的识别能力。它不破坏蛋白结构，能减少对蛋白质之间相互作用的破坏，从而提高实验的特异性。 𐟥› 脱脂奶粉或BSA：封闭剂的选择使用脱脂奶粉或BSA作为封闭剂时，需注意以下几点：脱脂奶粉不能与生物素化或伴刀豆蛋白标记的抗体一起使用，因为脱脂奶粉含有糖蛋白和生物素。如果封闭剂中含有磷酸酶，用磷酸化特异性抗体分析磷酸化蛋白时可能会受到影响，因为磷酸酶与印记膜上的磷酸化蛋白接触可使之去磷酸化。某些抗体用BSA封闭时可能会产生比脱脂奶粉更强的信号，请仔细阅读说明书注明的注意事项和膜的特殊封闭方法。通过这些技巧，可以有效提高Western Blot实验的准确性和可靠性，为蛋白质研究提供有力支持。

实验盲盒坑，小白必看！最近两个月的实验经历简直像是在开盲盒，每次都有新的bug等着我。以下是我总结的一些实验bug，希望能和大家分享一下，希望大家能从我的经历中吸取教训。制冰机门忘记关 ❄️ 原因：打冰的时候，盆子太重，打完冰就想赶紧扛走，结果忘了关制冰机门。改进：每次打冰都要记得关门。后续：虽然记得关门了，但挖冰勺却落在制冰机里了。忘记设timer ⏰ western blot的bug 𐟐› 每次做western blot都像是在开盲盒，修复了这个bug，又有新的bug出现，完全不知道会有什么新问题。显影的条带出现白色反光 𐟌ˆ 原因：配制TBST时忘记加tween 20，导致洗掉特异性条带。改进：配置新的TBST，bug消失。条带呈一条直线 𐟓 原因：未知，无法修复。膜上有一块块黑斑 𐟖䊥ŽŸ因：封闭液（脱脂牛奶+TBST）没有摇均匀，导致未溶解的颗粒还在膜上。改进：在拍电泳的时候就配好封闭液，至少摇了两个小时，bug消失。非特性条带很多 𐟌Ÿ 原因：未知，无法修复。显不出条带 𐟘𕊥ŽŸ因：一张膜剪开两半，上下各孵育一张，加反了抗体。改进：用一抗二抗去除液。本应一抗收集，二抗丢弃；我：一抗丢弃，二抗收集 𐟧ꊥŽŸ因：一抗贵，二抗便宜。琼脂糖凝胶电泳的bug 𐟧슭arker忘记加loading 𐟚능ꌦ„外 𐟒劥𜀤𘙩†‡的盖子，“啵”的一声，盖子上的余液溅到手臂上。改进：开的时候用手捂着瓶口，就不会溅出来，bug消失。制胶的时候插梳子，溅到脸上。改进：离远一点插；插慢一点，让它沿壁流下来，bug消失。希望这些小故事能给大家带来一些笑料，也希望大家能从我的经历中吸取教训，避免踩同样的坑。实验室的小白们，加油！𐟒ꀀ

实验结果图缺失条带？可能原因及解决方法亲爱的实验小伙伴们，最近有不少小伙伴在问实验结果图中没有条带的问题，别担心，这里有一些可能的原因和解决方法供大家参考： 𐟔 可能原因及建议： 1️⃣ 一抗和二抗加错了，或者不匹配请仔细检查一抗和二抗是否加对，确保选择的是针对一抗来源种属的二抗。 2️⃣ 一抗浓度过低或蛋白浓度不足尝试使用新鲜的抗体；调整抗体浓度，避免重复使用。 3️⃣ 发光液失效或不灵敏使用新鲜的灵敏型发光液。 4️⃣ 转膜不充分或时间过长用丽春红染膜确认条带是否转至膜上，适当调整转膜时间和电流。 5️⃣ 封闭过度或洗脱过度减少封闭时间；减少洗膜时间，降低去垢剂浓度，建议使用不高于0.1%的温和去垢剂Tween-20。 6️⃣ 蛋白降解提取蛋白样本时加入蛋白酶抑制剂；处理样本时在冰上操作。 𐟤” 如果有更多问题，欢迎大家一起探讨！

BCA蛋白浓度测定法：从原理到操作步骤 𐟌ˆ 原理： BCA蛋白浓度测定法是基于改良的Lowry法，利用二喹啉酸（bicinchoninic acid）作为反应剂。这个方法结合了双缩脲反应和显色反应：在碱性介质中，蛋白质将Cu2+还原成Cu1+，然后使用含有二喹啉甲酸（BCA）的独特试剂，通过比色法检测Cu1+，具有高灵敏度和高选择性。显色物质是由两分子的BCA和一分子的亚铜离子螯合形成的紫色物质。 𐟌Ÿ 特点：优点：灵敏度高：检测浓度下限达到10/ml，最小检测蛋白量达到0.2，待测样品体积为1-20。操作简便：在碱性溶液中BCA比Folin试剂稳定，只需一种试剂即可完成检测。兼容性强：测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的去污剂等化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween-20，60，80。线性范围广：在20-1000/ml浓度范围内有良好的线性关系。显色速度快：相同的样品孵育较短时间即可进行吸光度测定。缺点：容易受到能与铜离子反应的螯合剂，例如EDTA，巯基乙醇以及蛋白质内半胱氨酸等的影响。 𐟓 步骤（视试剂盒而定）： 1️⃣ 蛋白标准品配制：室温完全溶解蛋白标准品，取20⵬ 5mg/ml BSA蛋白标准溶液用PBS溶液稀释至100⵬，使其终浓度为1.0 mg/ml。 2️⃣ 配制BSA标准测定溶液。 3️⃣ 工作液配制：将A液与B液按照50:1的比例混合，配成BCA工作液，并混匀。 4️⃣ 加样：将待测样本以适当体积加入并用PBS补足至20ul。 5️⃣ 孵育：向各孔中加入200⵬的工作液，混匀后37℃孵育30min，亦可室温放置2h。 6️⃣ 测定吸光度：测定562nm处的吸光度，记录数值，代入标曲计算浓度。 7️⃣ 绘制标准曲线计算样品浓度：新建一个Excel表格，将得到的标准品的吸光度按照下方表格排列，并按照试剂说明说输入相应标准品的浓度。选中标准品吸光度和浓度，点击“插入”，选择散点图。点击散点图的任意一点，右键选择添加趋势线；点击设置，趋势线选项选择“线性”，勾选“显示公式”和“显示R平方值”，即可得到标准曲线。计算样本浓度：代入公式直接计算即可，但要记得样本稀释倍数再回算回去。 𐟔 通过这些步骤，你可以准确地测定蛋白质的浓度，为后续的实验提供可靠的数据支持。

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