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组织石蜡切片制作步骤直播_组织石蜡切片制作步骤有哪些(2024年12月看点)

内容来源：兔子在线电影所属栏目：新闻更新日期：2024-12-03

组织石蜡切片制作步骤

𐟔짟𓨜᥈‡片制作全攻略✨ 𐟌᯸在探索微观世界时，石蜡切片技术是不可或缺的一环。这种技术能让柔软或软硬不均的组织变得易于切片，制作出厚薄均匀的切片。 𐟒‰首先，我们需要用包埋剂来处理组织。包埋剂是一种能浸透组织内部并使其硬化的物质，如石蜡。这样，我们就能轻松地将组织切成薄片，甚至可以达到2-8微米！ 𐟔꧟𓨜᥈𖧉‡法的步骤包括固定、脱水、透明、浸蜡，然后将材料包埋在石蜡里进行切片。这种方法非常适用于光学显微镜的制片，能制作出连续且极薄的切片。 𐟒ᩙ䤺†某些不耐受石蜡切片法中使用的药剂的材料外，几乎所有材料都可以用此法制片。然而，这种方法也有其缺点，如制作时间较长、操作过程复杂，以及材料可能发硬或发脆。 𐟔„在切片过程中，我们通常会使用旋转式切片机来进行操作，以确保切片的均匀性和效率。 ✨通过掌握石蜡切片技术，我们可以更深入地了解组织的结构和功能，为科研工作者提供宝贵的实验数据。

𐟔젧Ÿ𓨜᥈‡片HE染色全攻略 𐟌ˆ 𐟓Œ 组织包埋步骤：乙醇脱水：将组织依次浸泡在70%、80%、90%、95%、100%的乙醇中，各40分钟。注意，骨性和钙化组织需在脱钙液中浸泡24小时。透明处理：将组织依次浸泡在三个二甲苯中，每缸各1小时。浸蜡：将组织依次浸泡在三个石蜡缸中，每缸各1小时。包埋：将液态石蜡倒入模具盒中，将浸好蜡的组织块平放底部，切面朝下。待石蜡凝固后去掉包埋框，完全冷却后修整蜡块。 𐟔ꠥˆ‡片制作：将预冷的蜡块固定在切片机上，调节切片厚度为4，切成厚度均匀的切片。用毛笔轻轻托起切片，放入展片箱中，水温控制在45℃左右。待切片摊平整后捞片，贴附至载玻片上，放置在65℃烤片机上烤1小时，再放入烘箱内烘烤2小时。 𐟌ˆ 石蜡切片脱蜡：将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ10分钟、二甲苯Ⅱ10分钟、二甲苯Ⅲ10分钟、无水乙醇Ⅰ5分钟、无水乙醇Ⅱ5分钟、90%酒精5分钟、80%酒精5分钟、70%酒精5分钟、50%酒精5分钟。 𐟎蠈E染色：石蜡切片入苏木素染0.5-1分钟，自来水漂洗。 1%盐酸酒精分化数秒，自来水漂洗。 1%氨水水溶液返蓝1分钟，流水冲洗数秒。放入伊红染液中染色数秒，流水漂洗。 𐟒砨„𑦰𔥰片：石蜡切片依次放入75%乙醇2分钟、85%乙醇2分钟、无水乙醇5分钟、无水乙醇5分钟、二甲苯5分钟透明。将切片从二甲苯中取出，中性树胶封片。 𐟔 结果判读：细胞核为蓝色，细胞质为红色。

𐟔짟𓨜᥈‡片制作全攻略✨ 𐟓Œ制作石蜡切片，这些步骤不能少！ 1️⃣ 固定组织：使用10%中性福尔马林或4%PFA固定组织12-24小时，确保固定充分，形态保存完整。 2️⃣ 切片准备：将组织切片至2-8um，并贴在防脱玻片上。避免在水浴捞片时添加粘合剂，样本应置于玻片正面中央。 3️⃣ 烘干切片：将玻片置于40-50℃的加热台上，烘干12小时以上，确保切片与载玻片之间水分完全干燥。 4️⃣ 观察与使用：建议在制作后一月内使用切片，以确保最佳效果。在复水后，使用荧光显微镜观察是否有自发荧光。 𐟒ᥰ贴士： - 组织切片应紧贴玻片，无空泡和褶皱。 - 玻片需无破损、划伤或污渍。 - 组织应包含至少1000个细胞。 - 坏死组织、细针穿刺物等可能影响染色效果。遵循这些步骤，你的石蜡切片制作将更加完美！𐟎‰

𐟧젧Ÿ𓨜᥈‡片HE染色实验全攻略 𐟓– 𐟔젧𛄧𛇥Œ…埋步骤：乙醇脱水：将组织依次浸泡在70%、80%、90%、95%和100%的乙醇中，各40分钟。注意，骨性和钙化组织需在脱钙液中浸泡24小时。透明处理：将组织依次浸泡在三个二甲苯中，各1小时。浸蜡：将组织依次浸泡在三个石蜡缸中，各1小时。包埋：将液态石蜡倒入模具盒中，将浸好蜡的组织块平放底部，切面朝下，待石蜡凝固后去掉包埋框，完全冷却后修整蜡块。 𐟔ꠥˆ‡片制作：将预冷的蜡块固定在石蜡切片机上，使蜡块的切面与刀口平行，刀的倾斜度通常为15度。调节切片厚度为4微米，切成厚度均匀的切片。用毛笔轻轻托起切片，放入展片箱中，水温控制在45度左右，待摊平整后捞片。将切片贴附在载玻片上，放置在65度的烤片机上烤1小时，再放入烘箱内烘烤2小时。 𐟌Š 石蜡切片脱蜡至水：将石蜡切片依次放入二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ中各10分钟，再放入无水乙醇Ⅰ、Ⅱ中各5分钟，然后依次放入90%、80%、70%和50%的酒精中各5分钟进行梯度脱蜡。 𐟎蠈E染色：将石蜡切片放入苏木素染液中染色0.5-1分钟，自来水漂洗。用1%盐酸酒精分化数秒，自来水漂洗。用1%氨水返蓝1分钟，流水冲洗数秒。放入伊红染液中染色数秒，流水漂洗。 𐟔– 脱水封片：将石蜡切片依次放入75%和85%的乙醇中各2分钟，再放入无水乙醇中5分钟两次。将切片从二甲苯中取出，用中性树胶封片。 𐟔 结果判读：细胞核为蓝色，细胞质为红色。

𐟧숅染色组织切片制作指南𐟒‰ 𐟔즃𓨦了解HE染色组织切片的制作过程吗？跟着我们的步骤，一步步来！ 1️⃣ 组织包埋处理： - 𐟍𖤹™醇脱水：70%-100%乙醇，每级40分钟，注意骨性及钙化组织需在脱钙液中浸泡24小时。 - 𐟒穀明：二甲苯浸泡，每缸1小时，共三缸。 - 𐟕ﯸ浸蜡：石蜡浸泡，每缸1小时，同样三缸。 - 𐟎襌…埋：液态石蜡倒入模具，放置组织块，待石蜡凝固后修整。 2️⃣ 切片制作： - 𐟔ꥰ†预冷蜡块固定在切片机上，调节切片厚度为4微米。 - 𐟖Œ️用毛笔轻轻托起切片，放入展片箱中，水温约45℃。 - 𐟓–贴附切片：将载玻片垂直入水，贴附切片至三分之二处。 - 𐟔姃䧉‡：65℃烤1小时，再烘烤2小时。 3️⃣ 石蜡切片脱蜡至水： - 𐟧𜤾次放入二甲苯、无水乙醇、各级酒精中脱蜡。 4️⃣ HE染色： - 𐟒™苏木素染0.5-1分钟，自来水漂洗。 - 𐟧걥盐酸酒精分化数秒，再自来水漂洗。 - ❤️1%氨水返蓝1分钟，流水冲洗。 - 𐟍Ž伊红染液染色数秒，流水漂洗。 5️⃣ 脱水封片： - 𐟔줾次放入各级乙醇、二甲苯中透明。 - 𐟒礸�禠‘胶封片。 6️⃣ 结果判读：细胞核为蓝色，细胞质为红色。𐟔 完成以上步骤，你就成功制作了HE染色组织切片！𐟎‰

石蜡切片制备中的常见问题及解决方法在临床病理和科研工作中，制备出高质量的石蜡切片至关重要，它直接影响到后续染色的效果。一张平整无刀痕的切片，往往受到多种因素的影响，包括材料本身、固定、气候、脱水、刀片、玻片等。今天我们来分享一些制备石蜡切片的实用技巧。脱水步骤 𐟒犨„𑦰𔦘履𓨜᥈‡片的关键步骤。组织取材后，需要充分固定，然后进行脱水透明处理。脱水组织的厚度不宜过厚，一般控制在3mm左右。为了确保脱水效果，可以设置多个脱水程序，大组织和小组织分开脱水，脂肪组织最好单独脱水。加湿技巧 𐟌쯸 南北气候差异较大，空气干燥时，可以在切片机旁放置一台加湿器，增加空气中的湿度，以防止切片蜡带静电导致切片自然打卷。刀片选择 𐟔ꊥˆ‡片前，蜡块需要预冷，选择质量好的刀片非常重要。刀片要锋利且韧性好。如果蜡带有刀痕，可以尝试移动刀片位置再切片。观察组织内是否有异物，避免用力过重或过轻影响切片质量。展片技巧 𐟌Š 展片时，要保持水面清洁，展片温度要合适，一般在40-42℃之间。对于展片困难的组织，可以先在冷水中展片，再转移到温水中充分展开。玻片选择 𐟏𚊤𘍥Œ类型的实验需要选择不同黏附程度的玻片。免疫组化实验或多色免疫荧光实验中，尽量选择粘附性更好的玻片。骨及皮肤样本在某些实验中也容易脱片，可以尝试不同类型的玻片以提高防脱效率。捞片技巧 𐟎㊦ž片时要倾斜玻片，从组织一端黏附到玻片上快速拷起。如有褶皱可退到水槽重新捞起。组织尽量捞片方正靠近玻片中央位置，以便后续滴染实验操作和组织全景成像。存放方法 𐟓报ˆ‡片晾干后装盒备用。如果短时间不使用且有组化需求，玻片和蜡块可以封蜡低温保存。特殊样本处理 𐟧ꊥ﹤𚎧‰𙦮Š样本如骨组织，如果脱水不完全，骨松质的位置后续染色容易脱片，可以调整拷片时间和温度。对于定位切片的样本，每切一次都需要修整蜡块，切面会发生变化，尽量一次性多切几张玻片备用。通过这些小技巧，可以有效提高石蜡切片的质量，为后续染色实验打下坚实基础。

双子叶植物重点生药简图与鉴别指南 𐟌🊰ŸŒ𘠥ꌧ›„与要求本次实验旨在通过观察双子叶植物的生药横切面和粉末特征，掌握其鉴别方法。实验材料包括槐花、苦杏仁、黄芪根、甘草根和番泻叶。 𐟔 实验仪器与试剂所需仪器：显微镜、载玻片、盖玻片所需试剂：水、氯仿 𐟓– 实验步骤 1️⃣ 制作石蜡切面：将槐花、苦杏仁、黄芪根、甘草根和番泻叶的横切面进行石蜡切片，观察其组织结构。 2️⃣ 制作粉末：将黄芪根和甘草根的粉末进行显微观察，识别其特征。 3️⃣ 绘制简图：根据观察结果，绘制槐花、苦杏仁、黄芪根、甘草根和番泻叶的横切面和粉末特征简图。 𐟓𗠧”Ÿ药简图与鉴别要点槐花：花瓣呈黄色，花心为褐色，具有香气。苦杏仁：果实呈椭圆形，外皮光滑，内含杏仁核。黄芪根：根呈圆柱形，表面有纵纹，断面呈黄色。甘草根：根呈圆柱形，表面有纵纹，断面呈黄白色。番泻叶：叶片呈椭圆形，边缘有锯齿，背面有短毛。 𐟔 实验结果与讨论通过观察和比较不同生药的横切面和粉末特征，可以得出以下结论：槐花的横切面显示其花瓣结构清晰，花心明显。苦杏仁的横切面显示其果实结构，内含杏仁核。黄芪根的横切面显示其根的结构，断面呈黄色。甘草根的横切面显示其根的结构，断面呈黄白色。番泻叶的横切面显示其叶片结构，背面有短毛。通过本次实验，可以更好地掌握双子叶植物的鉴别方法，为后续的药学研究打下基础。

免疫组化怎么做？超详细教程来啦在医学检查中，免疫组化是一项非常重要的技术手段𐟒ᣀ‚很多患者在面对免疫组化检查时，往往充满疑惑𐟤”，免疫组化究竟是怎么做的呢？ 𐟒‰1、标本采集：通过手术切除、穿刺活检等方式获取组织标本𐟧죀‚ 𐟧겣€组织处理：将采集到的标本进行脱水𐟒磀透明、浸蜡等处理，然后制作成石蜡切片。 𐟒곣€抗原修复：常用的方法有热修复、酶修复等，可以使抗原重新暴露出来，提高检测的敏感性𐟔。 𐟔촣€抗体孵育：选择特定的抗体与切片上的抗原进行结合，帮助医生确定组织中的特定成分𐟔죀‚ 𐟑€5、显色和观察：在抗体与抗原结合后，通过加入显色剂使结合部位显色，可以判断抗原的表达情况𐟓Š。患在面对免疫组化检查时，不要过于紧张和焦虑𐟘Œ，应积极配合医生的检查和治疗。同时，保持良好的心态和生活习惯，有助于疾病的康复。希望大家都能关注自己的健康，定期进行体检𐟩𚯼Œ早发现、早诊断、早治疗。祝愿大家都拥有一个健康的身体！#领航计划#

HE染色：组织学实验的经典染色法 𐟎芥˜🯼Œ大家好！今天我们来聊聊HE染色，这可是组织学、胚胎学和病理学研究中的老大哥了。HE染色法其实就是在石蜡切片技术中常用的染色方法之一。它用苏木精染液和伊红染料来给细胞和组织着色，具体来说，苏木精染液是碱性的，主要让细胞核内的染色质和胞质内的核酸变成紫蓝色；而伊红则是酸性染料，主要让细胞质和细胞外基质中的成分变成红色。 HE染色的特点嘛，首先是它能在长期保存的情况下保持清晰度，不容易产生沉淀和金属颗粒。其次，它的应用范围非常广，可以用在人、动物、畜牧、水产等各个领域。无论是组织石蜡切片、冰冻切片还是组织细胞的染色，都能用它搞定。而且，苏木素染色液还能重复使用，真是经济实惠。说到实验步骤，其实也不复杂。首先，你要准备好你的石蜡切片，然后依次用苏木精染液和伊红染料进行染色。染色完成后，再用酒精和水进行脱水处理。最后一步就是封片了，用中性树脂将切片封好，这样你的HE染色切片就完成了！当然啦，做实验的时候还是要多加注意一些小细节。比如，染色时间不能太长也不能太短，不然颜色会不均匀。还有，脱水处理的时候要注意酒精的浓度和时间，不能让切片变得太干或者太湿。总之，HE染色法虽然简单但非常实用，是每个实验室都必备的技术之一。希望这篇文章能帮到你们，如果有任何问题或者想法，欢迎大家在评论区交流哦！𐟘Š

TRAP染色：破骨细胞的显微镜揭秘 𐟔슣## 染色原理抗酒石酸酸性磷酸酶（tartrate-resistant acid phosphatase，TRAP）是破骨细胞的标志性酶。在酒石酸环境中，TRAP水解荼酚磷酸盐，产生的a-蔡酚与重氮副品红偶联，形成不溶性的紫红色沉淀。骨组织中的破骨细胞分泌TRAP，通过这种方法可以显示破骨细胞的活性。此方法适用于骨组织的石蜡切片、冰冻切片及培养的破骨细胞。染色步骤准备工作：预热去离子水至37℃，将Fixation solution（固定液）室温放置。将细胞爬片浸没在固定液中30秒，然后用去离子水彻底清洗，避免爬片过干。 PBS清洗：用PBS洗一次，吸弃时注意不要吸掉细胞。溶液准备：准备两个1.5mL的ep管，各加入Fastgarnet GBC Base solution（快速石榴石型碱溶液）和Sodium Nitrite Solution（亚硝酸盐溶液），轻轻混合均匀后室温静置2分钟。混合液配置：在一个标签为A（或B）的管中，按以下比例配置混合液：Naphthol AS-BI Phosphate Solution（蔡酚AS-BI磷酸溶液）、Acelate Solution（醋酸盐溶液）和37℃预热的去离子水。最后加入Tartrate Solution（酒石酸盐溶液），避光保存。染色：将配置好的染色液倒入合适的染色缸中，或在35mm皿上放置可拆卸的96微孔板，用锡箱纸包裹后放置于一次性手套中，水浴加热至37℃。孵育：将爬片放入染色缸中，37℃避光孵育1小时。清洗：孵育后，用去离子水彻底清洗爬片。复染：在Hematoxylin Gill NO.3（苏木精洛液）中复染2分钟。冲洗：用碱性自来水冲洗几分钟，直到出现蓝色的核。封片：自然晾干后，用甘油明胶封片，显微镜观察。染色结果破骨细胞细胞浆呈紫红色，胞核为蓝色。注意事项骨组织容易脱片，操作过程中水洗要轻柔。通过TRAP染色，我们可以直观地观察到破骨细胞的活性，进一步了解骨组织的健康状况。